GEMINI （900-108）900108胎牛血清 血清開(kāi)始進(jìn)行試用時(shí)，如果是重新復(fù)蘇細(xì)胞，建議用原培養(yǎng)體系進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇，待細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)入zuiyou狀態(tài)后再進(jìn)行測(cè)試。測(cè)試時(shí)不建議直接100%直接換成新血清體系進(jìn)行培養(yǎng)，而應(yīng)該按照比例進(jìn)行梯度替換(例如，shou次換液按照新舊體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后wanquan替換。對(duì)于一些對(duì)培養(yǎng)體系比較敏感的細(xì)胞，可以進(jìn)一步優(yōu)化替換比例。)通過(guò)這種方法可以避免細(xì)胞因環(huán)境改變而出現(xiàn)應(yīng)激或者異常造成不必要的損失。

血清在4度冰箱能放多久？對(duì)細(xì)胞有何影響呢？

根據(jù)文獻(xiàn)顯示血清和血漿在4℃條件儲(chǔ)存2小時(shí)，血清中的成分就會(huì)發(fā)生變化，所以建議用戶在使用血清要分裝成自己常用的規(guī)格，建議現(xiàn)配現(xiàn)用。如果不能實(shí)現(xiàn)現(xiàn)配現(xiàn)用的話，配好的培養(yǎng)基在4℃保存的時(shí)間不要超過(guò)1周，如果期間使用頻次較高或恢復(fù)室溫次數(shù)較多時(shí)，能夠保存的時(shí)間還會(huì)減少。

血清沉淀是什么?

血清非人工產(chǎn)品，沉淀出來(lái)系自然現(xiàn)象，沉淀主要是纖維蛋白原，其次是鹽析出。如磷酸鈣等，還有一些danguchun和脂肪酸以及其他蛋白析出物質(zhì)等

哪些因素血清沉淀會(huì)增加？

血清熱滅活、37℃培養(yǎng) 、反復(fù)凍融、溶解過(guò)程中沒(méi)有搖勻、伽馬射線照射、長(zhǎng)期存放在 2-8°C、血清加入到RPMI 1640中時(shí)、pH升高時(shí)、在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基的蒸發(fā)等等因素都會(huì)導(dǎo)致沉淀的增加。

沉淀不會(huì)影響其對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用？

技術(shù)人員對(duì)此問(wèn)題有過(guò)深入研究證明，血清沉淀對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有影響，但有一個(gè)例外：沉淀對(duì)巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)會(huì)有一些影響。

沉淀這種現(xiàn)象發(fā)生在所有的血清中？

“G*品牌的胎牛血清沒(méi)有預(yù)老化,如果存放在2-8℃，血清中的各種蛋白或酯類有可能會(huì)凝聚析出,出現(xiàn)沉淀或混濁. 這種不會(huì)影響血清對(duì)對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用.我們建議把血清存放在 –20℃，并避免反復(fù)凍融。S*品牌胎牛血清說(shuō)明書中說(shuō): “在融化過(guò)程中混濁多絮狀沉淀，這種現(xiàn)象對(duì)多數(shù)血清來(lái)說(shuō)是正常的，并不影響其使用質(zhì)量。但它影響血清的外觀，影響瓶與瓶之間的一致性。

有沉淀出現(xiàn)的血清并不是污染

檢測(cè)血清是否被污染的方法是將血清接種到血酯板上，培養(yǎng)后看是否有菌落形成。在1000x顯微鏡下，有經(jīng)驗(yàn)的通過(guò)觀察細(xì)胞液狀態(tài)和常見(jiàn)細(xì)菌的外形即可鑒別，或者通過(guò)有無(wú)革蘭氏染色的細(xì)菌，也可以判斷血清是否被污染。

如何去除血清中的沉淀?

如想去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝到無(wú)菌離心管中，以400g離心，上清液即可直接加入到培養(yǎng)液中使用。不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)榭赡茏枞麨V膜。

血清溶解過(guò)程如何減少沉淀

將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱12-24小時(shí)左右使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地輕輕搖晃均勻。切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來(lái)的血清直接放在水浴中，無(wú)論室溫的水或者37℃的水，因?yàn)樵谒≈醒逖杆偃诨?，很大的溫?-20℃到37℃，溫差為57℃)極其容易造成血清產(chǎn)生沉淀。直接放65℃水浴中更是極其殘忍的做法，是對(duì)血清的褻玩，對(duì)科學(xué)規(guī)則的粗暴踐踏!

胎牛血清凍存注意事項(xiàng)

需要長(zhǎng)期保存的血清有必要儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)刻切勿超過(guò)1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因而，血清在凍入低溫冰箱前，有必要預(yù)留一定體積空間，不然易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?。大包裝的瓶裝血清凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)，使溫度與成分均一，削減沉積的發(fā)作。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃融化，溫差大的情況下血清容易形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積和沉淀絮狀物。

血清是否需要熱滅活處理?

熱滅活是指56℃， 30分鐘加熱已chedi凍結(jié)的血清。加熱過(guò)程中須規(guī)矩?fù)u晃均勻。目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非有必要，一般不建議做此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃?huì)形成血清沉積增多，而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有: 平滑肌細(xì)胞收縮、 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺、 增強(qiáng)吞噬作用、促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)作化學(xué)趨化和活化。相關(guān)研究的使用者可以考慮血清增加熱滅活處理。

血清使用濃度是多少?

原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔，部分細(xì)胞原代提取時(shí)會(huì)使用20%血清，大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)時(shí)會(huì)使用10%的血清濃度。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度，還需要根據(jù)細(xì)胞特性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖鰷y(cè)試和調(diào)校。

GEMINI （900-108）900108胎牛血清 血清批間差是客觀存在的，因?yàn)檠逯破穪?lái)源于天然活體，供體牛只的生理狀況、健康狀況均不同，且受飼養(yǎng)環(huán)境的地形、風(fēng)貌、飲食、水源等影響，體內(nèi)各類蛋白、生長(zhǎng)因子和酶類的含量均有巨大差異，所以血清具有含量復(fù)雜且不固定的特性，批間差異也是有可能的，因此選擇批間差異小的血清不僅可以保證血清質(zhì)量，確保細(xì)胞培養(yǎng)效果，還能減少由于批間差異帶來(lái)的使用前測(cè)試，且避免實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不可重復(fù)性。

建議您可以一次購(gòu)進(jìn)多瓶同批次的血清或者批量很大的批號(hào)血清(血清效期通常為5年，建議您一次購(gòu)買足夠使用1年以上的用量)，以減少由于批次的差異對(duì)您實(shí)驗(yàn)的影響。